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개요: 생대생들 중에 나같은 초심자 (?) 들이 있을까봐, 그리고 중간고사 기간도 다가오니 기억을 되살릴 겸 유전공학1을 파트 1부터 차근차근 되살려 짚어볼 것이다. 참고교재는 음...지금 교재가 없어서 제목과 저자는 안적을랭 귀차나 1. 일단 가장 간단하게 genetics의 birth를 짚어보자 1) mendel's law to explain the inheritance of biological characteristics 2) heritable property is controlled by a factor called gene 3) gene resides on chromosomes by W. Sutton 4) Morgan's fruit fry experiment: genetic mapping over 2000 genes on 4 chromosomes 이상은 뭐...산업혁명 일어나고 그에 맞춰 기술에 유전공학 적용 어쩌구 뭐 그런얘기이고 (아니면 말해줘ㅠㅠ 수정할겡) 2) 자 갑작스럽지만 본론ㄱㄱ : gene cloning 이 글 이해할 정도면 유전자는 그 자체로 의미없고 vector가 필요하단 걸 알겠지? 벡터가 되기위한 조건이 두 개가 있는데 1. Should be easy to insert in the host cell 2. Possibly be cloned with themselves 요정도? 이것을 다 충족하는건 파아지DNA와 Plasmid 라는 건 다 알테고 Cloning 1 construction of recombinant dna molecule 2transfer it into host cell 3 multiplication of RDM 4 division of host cell 5 cell division-> clone formation. 동일세포집단이지 PCR. Polymerase chain reaction 1. 94도씨-> denaturation: break the two strands of dsDNA 2. 50-60도씨-> annealing or hybridization: an excess of short DNA molecule. Called oligonucleotides or primers which anneal to the DNA at specific position 3. 72-74 Synthesis or polymerization: Taq dna polymerase (thermus aquaticus) . Synthesizes new strands of DNA. Complementary to the template DNA 4. Repeat 1.2.3 4 25-30 times Both can provide a pure sample of an individual gene. Separated from all the others in the cell 이들이 왜 중요하느냐? 얘네들은 specific gene의 pure sample을 얻을 수 있기 때문에 중요한거야. 근데 여기서 selection system이 중요하고 여기서 사용하는게 selectable marker 이란 말씀이지 예를 들어 1. Construction of recombinant pBR322 2. Transform E.coli trpA- 3.plasmid gene is expressed 4plate on to minimal medium 근데 pcr이 걸리는 시간도 빠르고 특정한 시퀀스만 계속 복제가 가능한데, 왜 아직도 고전 기법인 클로닝을 쓰느냐? 여기서 pcr의 두가지 한계가 나타나는데. 1. the sequence of the annealing sites should be known 2. Segment up to over 40kb could be copied vut this is still shorter than the lengths of many genes
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